無血清培養(yǎng)基UltraCULTURE Serum-free Medium
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近日，汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院化學(xué)教研室盤鷹、何小英和張魯勉等共同發(fā)表論文，旨在探討無血清條件下健康人外周血單個核細(xì)胞(PBMC)快速誘導(dǎo)生成成熟樹突狀細(xì)胞(dendritic cell，DC)的體外培養(yǎng)方法。研究指出，在無血清培養(yǎng)條件下配合使用鈣離子載體A23187，可以更快速、有效地誘導(dǎo)健康人PBMC分化成更成熟、功能更強(qiáng)的DC。該文發(fā)表在2013年13卷第(4)期《中國熱帶醫(yī)學(xué)》上。
分離獲取健康者外周血PBMC，將細(xì)胞分為血清組和無血清組：設(shè)血清組A組為對照組，B、C、D組為無血清組。A組加入10％FCS的RPMI1640完全培養(yǎng)液，B組加入單核/巨噬細(xì)胞無血清培養(yǎng)液MΦ-SFM，兩組均加入rhGM-CSF+IL-4+rhTNF-α培養(yǎng)9d；C組加入鈣離子載體(CI)A23187，D組加入rhGM-CSF+A23187，兩組細(xì)胞均培養(yǎng)于MΦ-SFM中48h。于倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞表型，MTT比色法檢測各組細(xì)胞刺激同種異體T淋巴細(xì)胞增殖的能力。
在無血清條件下，單獨(dú)給予A23187或A23187+rhGM-CSF聯(lián)合刺激48h，均可誘導(dǎo)PBMC分化成具有典型形態(tài)的DC；與血清組細(xì)胞相比，細(xì)胞表面標(biāo)志CD80、CD86和CD83分子具有相似的高表達(dá)(P＞0．05)，對同種異體T淋巴細(xì)胞的刺激能力無顯著性差異(P＞0．05)。
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