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1.蛋白酶K： 能水解消化蛋白質(zhì)，特別是與DNA結(jié)合的組蛋白。再尿素和SDS中穩(wěn)定。一般工作濃度是50—100μg/ml，推薦反應(yīng)緩沖液：50mM Tris-HCl （pH7.5）,10mM CaCl2。 2.SDS: 十二烷基硫酸鈉. 溶解細(xì)胞膜上的脂類與蛋白質(zhì)，因而溶解膜蛋白而破壞細(xì)胞膜，并解離細(xì)胞中的核蛋白，SDS 還能與蛋白質(zhì)結(jié)合而沉淀 3.IPTG 異丙基-β-D-硫代半乳糖苷, 常用于藍(lán)白斑篩選及IPTG誘導(dǎo)的細(xì)菌內(nèi)的蛋白表達(dá)等. IPTG和乳糖的結(jié)構(gòu)相似，所以它和乳糖一樣，可以與乳糖操縱元的阻遏蛋白結(jié)合，使阻遏蛋白的空間構(gòu)像變化，四聚體解聚成單體，失去與操縱子特異性結(jié)合的能力，從而解除了阻遏蛋白的作用，使其后的基因得以轉(zhuǎn)錄合成利用乳糖的酶類。與乳糖不同的是，IPTG不被 β-半乳糖苷酶水解。常與X-GAL一起用于藍(lán)白斑篩選。作用極強(qiáng)的誘導(dǎo)劑,不被細(xì)菌代謝而十分穩(wěn)定 4.X-gal 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷，是IPTG的顯色試劑，在IPTG的催化下顯藍(lán)色。常跟IPTG一起用與藍(lán)白斑篩選。 5.G418: 一種抗生素，對(duì)幾乎所有的細(xì)胞都有毒性，是穩(wěn)定轉(zhuǎn)染最常用的選擇試劑。當(dāng)neo基因被整合進(jìn)真核細(xì)胞基因組合適的地方后 ,則能啟動(dòng)neo基因編碼的序列轉(zhuǎn)錄為mRNA,從而獲得抗性產(chǎn)物氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶的高效表達(dá) ,使細(xì)胞獲得抗性而能在含有Ｇ418的選擇性培養(yǎng)基中生長。Ｇ418的這一選擇特性 ,已在基因轉(zhuǎn)移、基因敲除、抗性篩選以及轉(zhuǎn)基因動(dòng)物等方面得以廣泛應(yīng)用。 6.DMSO 二甲基亞砜.實(shí)驗(yàn)室常用于作液體層析溶劑，同時(shí)用作測試物質(zhì)紫外消光值上時(shí)用作參照物.能溶于所有烷烴和烯烴。 7.曲拉通X-100 TritonX-100.用的細(xì)胞裂解液成分之一，在保護(hù)蛋白活性方面有一定作用. 能力介于NP40和SDS之間，偏向于NP40 8.NP-40 很溫和的去垢劑，1%濃度的基本可以破壞掉胞膜，而對(duì)核膜破壞的作用弱，結(jié)合特定的buffer可以獲得胞漿蛋白。 9、BSA 牛血清白蛋白. 主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。在動(dòng)物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中，添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。常用于蛋白定量中的內(nèi)參和抗體稀釋液。 10.甲酰胺 甲酰胺被用作凝膠電泳中RNA的穩(wěn)定劑，也用于穩(wěn)定毛細(xì)管電泳中的變性單股DNA。 11.TEMED 四甲基乙二胺。促凝劑。在中性及堿性pH條件下，加入TEMED可加速凝膠聚合 12.巰基乙醇 一種強(qiáng)還原劑。可還原蛋白二硫鍵，從而使蛋白保持溶解狀態(tài)，有利于與SDS的結(jié)合。使蛋白解離成單個(gè)亞基。 13.甲叉雙丙烯酰胺 N，N＇-甲叉雙丙烯酰胺，別名MBA，又叫亞甲基雙丙烯酰胺，次甲基雙丙烯酰胺，N，N＇-甲撐雙丙烯酰胺。作交聯(lián)劑與丙烯酰胺聚合而制備聚丙烯酰胺凝膠。 14.過硫酸銨 過硫酸銨（APS）的作用主要是提供自由基，然后在促凝劑TEMED的作用下使丙烯酰胺及甲叉丙烯酰胺聚合。 15.B27 一種添加劑，用于神經(jīng)肝細(xì)胞培養(yǎng)，被認(rèn)為具有抑制膠質(zhì)細(xì)胞生長的作用。 16.DTT 二硫蘇糖醇，常用還原劑，既有抗氧化作用。它能保護(hù)酶分子上的還原性基團(tuán)，維持還原性環(huán)境，穩(wěn)定酶的活性。又是一種蛋白質(zhì)變性劑，破壞二硫鍵，濃度不同，起到的作用也不同。 17.弗氏不完全佐劑和弗氏完全佐劑 弗氏完全佐劑是一種油包水的乳濁液，含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放，并刺激局部免疫反應(yīng)。弗氏不完全佐劑用于初次免疫刺激。為了減少副作用，不含結(jié)核分枝桿菌成分的弗氏不完全佐劑用于加強(qiáng)免 氏完全佐劑是一種油包水的乳濁液，能夠非常有效的誘導(dǎo)產(chǎn)生高滴度的抗體。弗氏完全佐劑含結(jié)核分枝桿菌的細(xì)胞壁成分，可以加強(qiáng)對(duì)抗原的抗體反應(yīng)。佐劑活性來自于油滴中免疫原的持續(xù)釋放，并刺激局部免疫反應(yīng)。 18.吐溫 20 Tween-20 ，常用的非離子去垢劑。 19.吐溫 80 Tweenum 80 ，除作乳化劑外，也用作某些水中難溶藥物的增溶劑。 20.十二烷基肌氨酸鈉 脫細(xì)胞試劑，制備脫細(xì)胞組織工程支架材料 21.PVPP PVPP對(duì)片劑具有崩解作用，能和各種不溶于水的藥物共容，能穩(wěn)定化各種懸浮劑，又具有形成絡(luò)合物的能力以及吸附作用等，因而可用作醫(yī)藥助劑。也用于除去啤酒中的多酚。 22.PIPES 哌嗪-N，N＇-二（2-乙磺酸）,實(shí)驗(yàn)室做緩沖劑用。全名是哌嗪-N,N-二（2-乙磺酸），pKa是6.80。不參與也不干擾生物化學(xué)反應(yīng)，價(jià)格比較貴。常用在免疫和細(xì)胞類的實(shí)驗(yàn)中，PIPES有時(shí)還被用來制備大腸桿菌感受態(tài)。 23.CTAB 十六烷基三乙基溴化銨，一種去污劑，可溶解細(xì)胞膜，它能與核酸形成復(fù)合物，在高鹽溶液中（（0.7 mol/L NaCl）是可溶的，當(dāng)降低溶液鹽濃度到一定程度（0.3 mol/L NaCl）時(shí)，從溶液中沉淀，通過離心就可將CTAB-核酸的復(fù)合物與蛋白，多糖類物質(zhì)分開。最后通過乙醇或異丙醇沉淀DNA，而CTAB溶于乙醇或異丙醇而除去。CTAB法是現(xiàn)在實(shí)驗(yàn)室最常用的一種提取核酸的手段。 24、HEPES 羥乙基哌秦乙硫磺酸,一種弱酸緩沖劑，主要作用是防止培養(yǎng)基pH迅速變化。在開放式培養(yǎng)條件下，培養(yǎng)基脫離了5%CO2的環(huán)境，CO2氣體迅速逸出，pH迅速升高，若加了HEPES，此時(shí)可以維持pH7.0左右。一般在進(jìn)行克隆化培養(yǎng)時(shí)要添加HEPES 25 MOPS 一種緩沖液，有抑制RNA酶的作用，一般和甲醛（用于變形RNA）用于RNA變性電泳 26 鹽酸胍 鹽酸胍等可使蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)中的氫鍵發(fā)生斷裂，這增加了非極性分子包括氨基酸側(cè)鏈的溶解度，減少了疏水相互作用。 27 PMSF Phenylmethanesulfonyl fluoride，中文名為苯甲基磺酰氟。用于抑制蛋白酶. PMSF嚴(yán)重?fù)p害呼吸道粘膜、眼睛及皮膚，吸入、吞進(jìn)或通過皮膚吸收后有致命危險(xiǎn)。一旦眼睛或皮膚接觸了PMSF，應(yīng)立即用大量水沖洗之。凡被PMSF污染的衣物應(yīng)予丟棄。PMSF在水溶液中不穩(wěn)定。應(yīng)在使用前從貯存液中現(xiàn)用現(xiàn)加于裂解緩沖液中。PMSF在水溶液中的活性喪失速率隨pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值為8.0時(shí)，20μmmol/l PMSF水溶液的半壽期大約為85min，這表明將PMSF溶液調(diào)節(jié) 為堿性（pH>8.6）并在室溫放置數(shù)小時(shí)后，可安全地予以丟棄。 28 溴酚藍(lán) pH指示劑，pH=3.0時(shí)呈黃色，pH=4.6時(shí)呈藍(lán)紫色。酸堿指示劑；非水滴定用指示劑，蛋白電泳染色；病毒化驗(yàn)等。 29 臺(tái)盼蘭 臺(tái)盼藍(lán)（Trypan Blue）或稱臺(tái)盼蘭，是細(xì)胞活性染料，常用于檢測細(xì)胞膜的完整性 30 二甲苯青FF 用于瓊脂糖聚丙烯酰胺凝膠電泳的示蹤染料, 易溶于水和醇，可與溴芬藍(lán)按照一定比例配置loading buffer 31 吖啶橙 是一種熒光色素，與細(xì)胞中DNA和RNA結(jié)合量存在差別，可發(fā)出不同顏色的熒光，與DNA結(jié)合量少發(fā)綠色熒光，與RNA結(jié)合量多發(fā)桔黃色或桔紅色熒光。該染料具有膜通透性，能透過細(xì)胞膜，使核DNA和RNA染色。在熒光顯微鏡下觀察，吖啶橙可透過正常細(xì)胞膜，使細(xì)胞核呈綠色或黃綠色均勻熒光；而在凋亡細(xì)胞中，因染色質(zhì)固縮或斷裂為大小不等的片斷，形成凋亡小體。吖啶橙使其染上致密濃染的黃綠色熒光，或黃綠色碎片顆粒；而壞死細(xì)胞黃熒光減弱甚至消失。吖啶橙AO常與溴化乙啶EB合用雙染，因EB只染死細(xì)胞使之產(chǎn)生桔黃色熒光，由此可區(qū)分出正常細(xì)胞、凋亡細(xì)胞及壞死細(xì)胞.它還可以用作移碼突變的誘變劑,能鑲嵌于兩個(gè)相鄰的堿基對(duì)之間，這樣在DNA復(fù)制過程中，會(huì)使DNA鏈增加或缺失一個(gè)堿基，造成移碼突變。吖啶橙染液有毒，操作時(shí)要戴手套，需避光。 32、EDTA和EGTA EDTA－－乙二胺四乙酸EDTA是螯合劑的代表性物質(zhì)。能和堿金屬、稀土元素和過渡金屬等形成穩(wěn)定的水溶性絡(luò)合物。此外EDTA也可用來使有害放射性金屬從人體中迅速排泄起到解毒作用。也是水的處理劑。EGTA－－乙二醇雙（2-氨基乙基）四乙酸在.Mg2+存在下測定Ca2+時(shí),可用EGTA直接滴定,滴定誤差小于0.3% ,比用EDTA滴定提高了選擇性..此外它與金屬離子形成的配合物的穩(wěn)定性普遍比相應(yīng)的EDTA配合物差。 33.、TRICINE N-[三（羥甲基）甲基]甘氨酸, 常見的電泳系統(tǒng)是Tris－甘氨酸系統(tǒng)；Tris－Tricine電泳則用于分子量小于10kDa的多肽和蛋白的電泳,能夠獲得較好的分離效果. 可以用前者代替。 34、PVP40 PVP40 中的CO - N = 有很強(qiáng)的結(jié)合酚類化合物的能力, 與其形成穩(wěn)定的復(fù)合物, 常用于提取RNA時(shí)除去酚類。 35、脫氧膽酸鈉 離子型去垢劑，作用有：1、 裂解細(xì)胞；2、 溶解蛋白，尤其是可以溶解一些難溶于水的蛋白，如膜蛋白等；3、很適合做WB，但在Co-IP中使用，需要謹(jǐn)慎 36、6-BA 細(xì)胞培養(yǎng)中用到，細(xì)胞分裂素。 37、碘代乙酰胺 也叫作碘乙酰胺,2-碘乙酰胺. 用于有機(jī)合成，在蛋白組學(xué)中組氨酸和半胱氨酸的烷基化試劑，用于多肽測序以及酶抑制劑等，蛋白組學(xué)級(jí)試劑 38、萘乙酸 NAA,為廣譜性植物生長調(diào)節(jié)劑,可促進(jìn)細(xì)胞分裂,誘導(dǎo)形成不定根,改變雌雄花比例,增加坐果率等 39、番紅O 藏紅T； 氧化還原指示劑；生物染色；酸堿指示劑；滴定分析亞硝酸鹽。 40、TTC 2，3，5-三苯基氯化四氮唑（紅四氮唑）,多用于藥物分析和瓊脂糖添加劑，在計(jì)數(shù)瓊脂中加入適量的TTC（0.5% TTC 1ML加到100ML瓊脂中）,細(xì)菌菌落長成紅顏色,對(duì)去除食品本底顆粒物干擾非常有意義. 無血清培養(yǎng)基UltraCULTURE Serum-free Medium 網(wǎng)址鏈接http://bitebo.com/a/gb2312/gongsixinxi/shichanghuodong/2014/0514/5157.html |
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