| ? | ||||||||||||
|
||||||||||||
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
 |
| 購(gòu)買(mǎi)進(jìn)口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物 www.pyjb.com.cn |
LONZA 中國(guó)銷(xiāo)售商畢特博生物 銷(xiāo)售：內(nèi)毒素檢測(cè)試劑盒 （點(diǎn)擊標(biāo)題進(jìn)入） 全國(guó)銷(xiāo)售熱線(xiàn)：400-833-9299 現(xiàn)貨促銷(xiāo)：細(xì)胞治療所用的lonza 04-418Q 無(wú)血清造血細(xì)胞培養(yǎng)基 (點(diǎn)擊標(biāo)題進(jìn)入） 干細(xì)胞治療所用的 lonza 12-725F 無(wú)血清培養(yǎng)基 (點(diǎn)擊標(biāo)題進(jìn)入）
本文主要介紹內(nèi)毒性，及其毒性反應(yīng)。內(nèi)毒素是革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞壁中的一種成分，叫做脂多糖。內(nèi)毒素只有當(dāng)細(xì)菌死亡溶解或用人工方法破壞菌細(xì)胞后才釋放出來(lái)，所以叫做內(nèi)毒素。內(nèi)毒素耐熱而穩(wěn)定，抗原性弱。在100℃的高溫下加熱1小時(shí)也不會(huì)被破壞，只有在160℃的溫度下加熱2到4個(gè)小時(shí)，或用強(qiáng)堿、強(qiáng)酸或強(qiáng)氧化劑加溫煮沸30分鐘才能破壞它的生物活性。內(nèi)毒素不是蛋白質(zhì)，因此非常耐熱。
關(guān)鍵詞：內(nèi)毒素，毒性反應(yīng)，內(nèi)毒素檢測(cè)，內(nèi)毒素去除
內(nèi)毒素與外毒素的區(qū)別 內(nèi)毒素與外毒素不同之處在于：內(nèi)毒素不能被稀甲醛溶液脫去毒性成為類(lèi)毒素；把內(nèi)毒素注射到機(jī)體內(nèi)雖可產(chǎn)生一定量的特異免疫產(chǎn)物（稱(chēng)為抗體），但這種抗體抵消內(nèi)毒素毒性的作用微弱。
內(nèi)毒素檢測(cè)方法 1、 凝膠法系通過(guò)鱟試劑與內(nèi)毒素產(chǎn)生凝集反應(yīng)的原理來(lái)定性檢測(cè)或半定量?jī)?nèi)毒素的方法。凝膠法鱟試劑常見(jiàn)規(guī)格為0.1ml/支或0.5ml/支或者更大裝量，使用時(shí)應(yīng)加除熱原水（細(xì)菌內(nèi)毒素檢查用水）復(fù)溶后使用。凝膠法是通過(guò)觀(guān)察有無(wú)凝膠形成作為反應(yīng)的終點(diǎn)。此法操作比較簡(jiǎn)單，經(jīng)濟(jì)，不需要專(zhuān)用測(cè)定設(shè)備，可以進(jìn)行定性或半定量測(cè)定。 2、動(dòng)態(tài)濁度法、終點(diǎn)濁度法、動(dòng)態(tài)顯色法、終點(diǎn)顯色法，這四種方法都是定量檢測(cè)內(nèi)毒素的。 根據(jù)檢測(cè)原理，終點(diǎn)濁度法和動(dòng)態(tài)濁度法都屬于濁度法。濁度法系利用檢測(cè)鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過(guò)程中的濁度變化而測(cè)定內(nèi)毒素含量的方法。終點(diǎn)濁度法未見(jiàn)商品化產(chǎn)品。動(dòng)態(tài)濁度法（又稱(chēng)動(dòng)態(tài)比濁法）是檢測(cè)反應(yīng)混合物的濁度上升某一預(yù)先設(shè)定的吸光度所需要的反應(yīng)時(shí)間，或是檢測(cè)濁度增加速度的方法。 3、終點(diǎn)顯色法和動(dòng)態(tài)顯色法都是屬于顯色基質(zhì)法。顯色基質(zhì)法系利用鱟試劑與內(nèi)毒素反應(yīng)過(guò)程中產(chǎn)生的凝固酶使特定底物顯色釋放出的呈色團(tuán)的多少而測(cè)定內(nèi)毒素含量的方法，根據(jù)產(chǎn)物顏色判斷內(nèi)毒素濃度，又稱(chēng)為比色法。
內(nèi)毒素去除方法 1、超濾膜和荷電微孔濾膜法 由于內(nèi)毒素具有較大的相對(duì)分子質(zhì)量，因此可選用超濾膜去除水中的內(nèi)毒素。 超濾膜的孔徑及材質(zhì)的選擇，需視被處理藥物的相對(duì)分子質(zhì)量、特性、及藥品中熱原的含量而定。如要截留大部分熱原，需采用截留相對(duì)分子質(zhì)量為5000或10000的超濾膜，此時(shí)操作過(guò)程中的壓力較高，另外對(duì)部分含有較大相對(duì)分子質(zhì)量成份的醫(yī)藥制劑也不合適。 因?yàn)樵诔嵩耐瑫r(shí)會(huì)阻留或吸附藥液中的有效成份，使產(chǎn)品收率大受影響。 由于內(nèi)毒素分子在中性條件下本身帶負(fù)電荷，因而選擇帶有正電荷的材質(zhì)如聚砜、聚丙 烯腈、聚酰胺等微孔濾膜可增強(qiáng)對(duì)內(nèi)毒素分子的去除效果，另外，也有人將硅藻土涂漬在纖維素膜上，然后在其上吸附上荷正電聚電解質(zhì)，用于去除內(nèi)毒素。但這些荷電微孔濾膜對(duì)內(nèi)毒素的去除效果受pH的影響較大。 2、石棉及活性炭吸附法 活性炭用于去除內(nèi)毒素是由于內(nèi)毒素的相對(duì)分子質(zhì)量較大，這種方法適合于組分較為 簡(jiǎn)單的小分子的溶液中或水中內(nèi)毒素的去除。比較適合純水溶液中內(nèi)毒素的去除。但由于活 性炭的選擇性較差，易吸附有效成份，且純化后溶液中的殘余活性炭不易去除，因此目前已 很少使用。 3、化學(xué)降解法 化學(xué)降解法是指用強(qiáng)酸、強(qiáng)堿或氧化劑等使內(nèi)毒素降解以達(dá)到去除內(nèi)毒素的目的，主要用于玻璃、塑料和其它高分子材料器皿上內(nèi)毒素的去除。這種方法有可能造成目標(biāo)產(chǎn)物的流失、降解或失活，因此對(duì)于具有生物活性物質(zhì)溶液中的內(nèi)毒素去除顯然是不利的。 4、相分離法 Liu等發(fā)展了一種采用Triton X-114從大量重組體蛋白制品中去除內(nèi)毒素的方法。據(jù) 此文報(bào)道，利用這種相分離法，對(duì)內(nèi)毒素的去除率達(dá)99%以上，對(duì)蛋白質(zhì)的回收率大于90%， 且不影響有效成份的活性。 5、離子交換色譜法 離子交換色譜法是根據(jù)內(nèi)毒素帶有部分負(fù)電荷的性質(zhì)，用陰離子交換色譜來(lái)去除內(nèi)毒 素，但這種方法不適合于溶液中存在其它帶負(fù)電荷物質(zhì)的情況。如二乙基胺乙基（DEAE） 陰離子交換介質(zhì)適于從堿性蛋白質(zhì)中去除內(nèi)毒素，成本低，吸附容量大。Chibata等人 采用一種以吸附劑吸附溶液中的內(nèi)毒素的方法去除內(nèi)毒素。吸附劑由不溶于水的載體（如 Cellulose）和含氮雜環(huán)的化合物（R-A-X）組成，其中R是含氮雜環(huán)基團(tuán)，A是烷基或鏈烯基，X是H原子或作用基團(tuán)。含氮雜環(huán)和烷基可由一個(gè)或多個(gè)取代物選擇性取代，此化合物直接或通過(guò)間隔臂連接到載體上。 6、親和色譜法 親和色譜法是利用物質(zhì)的生物學(xué)特性來(lái)達(dá)到物質(zhì)的分離，是去除內(nèi)毒素的一種較為理想 的方法。只要采用適當(dāng)?shù)呐浠瑢⑺梯d于親和色譜的基質(zhì)上合成出親和介質(zhì)，就可使它成 為一種去除內(nèi)毒素的高效能、高選擇性方法。相對(duì)于上述方法來(lái)說(shuō)，親和色譜法具有其顯著 的優(yōu)越性，去除率高、選擇性好。 自80年代起，組胺、組氨酸就開(kāi)始用作去除內(nèi)毒素的親和配基。Satoshi Minobe報(bào)道，以組氨酸為配基的柱介質(zhì)在低離子強(qiáng)度（I = 0.02），pH 3 ~ 8的條件下，對(duì)內(nèi)毒素的去除效果最好。商振華等在此基礎(chǔ)上制成了以組氨酸為配基的聚酰胺膜介質(zhì)，在所選擇的最佳條件下成功地應(yīng)用于BSA、溶菌酶等生物制劑中內(nèi)毒素的去除。Legeklallails等則成功地利用組氨酸為配基的中空膜（PEVA）去除了IgG中的內(nèi)毒素。
以上就是內(nèi)毒素與外毒素的區(qū)別，內(nèi)毒素檢測(cè)及去除方法的全部介紹內(nèi)容。
LONZA 中國(guó)銷(xiāo)售商畢特博生物 銷(xiāo)售：內(nèi)毒素檢測(cè)試劑盒 （點(diǎn)擊標(biāo)題進(jìn)入） 全國(guó)銷(xiāo)售熱線(xiàn)：400-833-9299 現(xiàn)貨促銷(xiāo)：細(xì)胞治療所用的lonza 04-418Q 無(wú)血清造血細(xì)胞培養(yǎng)基 (點(diǎn)擊標(biāo)題進(jìn)入） 干細(xì)胞治療所用的 lonza 12-725F 無(wú)血清培養(yǎng)基 (點(diǎn)擊標(biāo)題進(jìn)入） |
購(gòu)買(mǎi)進(jìn)口儀器、試劑和耗材——就在始于2001年的畢特博生物
www.pyjb.com.cn |
|
