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生物知識

細(xì)胞培養(yǎng)常識(三)

作者:admin 來源:本站 發(fā)布時間: 2016-09-20 18:43  瀏覽次數(shù):
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1
冷凍保存細(xì)胞之方法?

冷凍保存方法一:冷凍管置于4度30-60分鐘至-20度30分鐘至-80度16-18小時(或隔夜)至液氮槽vaporphase長期儲存。

冷凍保存方法二:冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3度至-80度以下,再放入液氮中長期儲存。-20度不可超過1小時,以防止冰晶過大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80度冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

2
這細(xì)胞欲冷凍保存時,細(xì)胞冷凍管內(nèi)有多少細(xì)胞濃度

冷凍管內(nèi)細(xì)胞數(shù)目一般為1*106 cells/ml vial, 融合瘤細(xì)胞則以5*106 cells/ml vial 為宜。

 

3
可否使用應(yīng)如何避免細(xì)胞污染?

細(xì)胞污染的種類可分為細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和霉?jié){菌、主要的污染源因為無菌操作記住不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細(xì)胞等。嚴(yán)格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之最好方法。

 

4
這支原體污染的細(xì)胞,是否能以肉眼觀察出異狀?

不能。除極有經(jīng)驗之專家外,大多數(shù)遭受支原體污染的細(xì)胞株,無法以其外觀分辨之。

 

5
CO2 培養(yǎng)箱之水盤如何保持清潔?

定期(至少每兩周一次)以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。

 

 

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