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· TransIT®-Lenti 轉染試劑 - 重組慢病毒生產的理想之選
· 慢病毒試劑
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· 參考文獻
重組腺相關病毒生產的理想之選
TransIT®-VirusGEN™ 在懸浮和粘附 AAV 細胞培養方面優于競爭對手試劑
用以下試劑用 pAAV-hrGFP、pAAV-RC 和 pAAV-Helper（1:1:1 比例，1.5μg/ ml，安捷倫科技）轉染在 FreeStyle™ F17 培養基 (A) 或粘附的 293T/17 細胞 (B) 中生長的懸浮 FreeStyle™ 293-F 細胞：TransIT®-VirusGEN™（2:1，體積重量比），Lipofectamine®2000（3:1，Thermo Fisher），Lipofectamine®3000（3:3:1，Thermo Fisher）或 25 kDa PEI（4:1，Polysciences）。使用收獲的病毒轉導 HT1080 細胞，并使用 guava easyCyte™ 5HT 流式細胞儀在轉導后 48 小時測量 GFP 表達。從具有少于 20%GFP 陽性細胞的病毒稀釋液測量功能滴度。誤差條表示一式三份孔的標準偏差。
TransIT®-VirusGEN™ 在懸浮和粘附慢病毒細胞培養方面優于競爭對手試劑
使用 pLKO 轉染在 FreeStyle™ F17 培養基 (A) 或粘附的 293T/17 細胞 (B) 中生長的懸浮 FreeStyle™ 293-F 細胞。1-puro-CMV-TurboGFP™ 轉移載體和由 MISSION®（1:1比例，1μg/ ml）驅動的慢病毒包裝混合物，含有以下試劑：TransIT®-VirusGEN™（3:1，體積重量比），Lipofectamine® 2000（2:1 (A) 或 3:1 (B)，Thermo Fisher），Lipofectamine® 3000（2:2:1 (A) 或 3:3:1 (B)，Thermo Fisher）或 25 kDa PEI（4:1，Polysciences）。收獲上清液，過濾 (0.45 µm)，并使用 293T/17 細胞滴定。在 8 μg/ml TransduceIT™ 存在下進行慢病毒轉導，并使用 Guava easyCyte™ 5HT 流式細胞儀在轉導后 72 小時測量 GFP 表達。從具有少于 20%GFP 陽性細胞的病毒稀釋液測量功能滴度。誤差條表示一式三份孔的標準偏差。
TransIT®-VirusGEN™ 實現廣泛的可擴展性
使用 TransIT®-VirusGEN™（2:1 試劑與 DNA 的比例（體積重量比），Mirus） ，使用指定的體積和培養容器，用 pAAV-hrGFP，pAAV-RC 和 pAAV-Helper（1:1:1 比例，1.5 總 μg/ ml，安捷倫科技）轉染在 FreeStyle™ F17 培養基 (A) 或粘附的 293T/17 細胞 (A) 中生長的懸浮 FreeStyle™ 293-F 細胞。將收獲的病毒用于轉導 HT1080 細胞，并通過流式細胞術測量 48 小時的 GFP 表達。從具有少于 20%GFP 陽性細胞的病毒稀釋液測量功能滴度。誤差條表示一式三份孔、燒瓶或培養皿的標準偏差。
特性
· 可靠 – 一致的高病毒滴度生產
· 可擴展 – 在各種規模上高效表達
· 很靈活 – 處理不同的病毒和細胞培養系統
描述
· TransIT®-VirusGEN™ 轉染試劑旨在增強包裝和轉移載體向貼壁和懸浮 HEK 293T 細胞類型的傳遞，并增加重組腺相關病毒 (AAV) 和慢病毒生產。
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