Apoptame
用途：用于細胞培養和低溫儲存的泛-caspase細胞凋亡抑制劑
描述：
在進行原代細胞培養過程中，細胞將會受到多種能夠促進凋亡的物理和生理上的壓力刺激。在細胞傳代、細胞保存和從低溫貯藏狀態復蘇細胞時都會有重大的凋亡應激反應發生。在這些過程中，不同種類的細胞在細胞生存力上都會發生不同程度的損失。阻止或抵消這些細胞凋亡信號便會給細胞培養過程的進展、穩定性和功能可靠性帶來重大改善。
眾所周知，血清具有提供營養、抗凋亡及促細胞生長的作用，這些對細胞生存力的保持具有十分重要的意義。盡管如此，甚至在添加有血清的培養物中，劇烈應激反應之后依然會有凋亡現象發生。這種應激反應能夠創造一種環境，其中凋亡活性超過內生保護因子抗拒凋亡的能力。添加caspase 抑制劑可以提供更高的保護水平，從而明顯提高含血清和血清耗盡兩種細胞培養體系的效率、繁殖能力和穩健性。Caspase 抑制劑在瞬間轉染和器官切片培養等敏感環境中顯得尤為重要。
Apoptame™ F和Q為高濃度的細胞培養添加物，在DMSO 中含被證實的凋亡抑制劑。提供的溶液濃度為20mM，按1 ul/ml（1:1000比例稀釋）的量加入培養基內防止凋亡。在常規細胞培養、添加新培養基或細胞凍存之前加入添加劑Apoptame™ F和Q。
APOPTAME™ F -第一代細胞凋亡抑制劑
肽－氟甲基甲酮（FMK）類caspase 抑制劑可以有效地應用于體內和體外，它們具有高效力、強細胞滲透性，屬于不可逆抑制劑，目前已經廣泛用于凋亡研究工作中并已被確定為此領域的基準試劑。體內模型研究發現，無論在誘導凋亡發生之前或之后，用此抑制劑進行處理可以減少組織損傷和成倍提高細胞存活率。
體外細胞研究主要集中在探求凋亡機理和caspase 相互作用。然而現在越來越多的研究轉向強調caspase 抑制劑在增進T-細胞、神經元、破骨細胞、造血細胞和胎兒胰腺細胞及其他細胞中組織培養的可靠性和效率方面的潛力。
Apoptame™ F 在DMSO 中含有一種氟甲基甲酮（FMK）抑制劑，可用作細胞培養添加劑或用于阻止凍存細胞復蘇過程中凋亡的發生。建議在細胞培養基中以1:1000的稀釋度加入此添加物。濾膜過濾除菌，-20℃貯存，使用前放到室溫（18.5℃融化）。
APOPTAME™ Q -第二代細胞凋亡抑制劑
第二代保護細胞的新產品推出了一個新型的非FMK結構、廣譜的caspase抑制劑，在提高細胞傳代效率、穩定性、降低細胞毒性等方面作出了改進。
活化的抑制劑溶于DMSO，是一個小分子量的疏水化合物。建議20mM的母液按1:1000的比例稀釋后直接加入組織培養基中（1:1000相當于1ul/ml培養基）。建議冰箱內取出的細胞用細胞盤培養后直接添加Apoptame™產品。Apoptame™ Q在37°C培養條件下，一直保持抑制活性高達60h。
Apoptame™ Q證實能夠抑制重組蛋白Caspases 1, 3, 8,9的活性，其IC50為25 to 400 nM。濾膜過濾除菌，-20℃貯存，使用前放到室溫（18.5℃融化）。
產品信息：
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產品貨號
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描述
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規格
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價格
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2070140
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Apoptame™ F
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0.5 ml
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2070175
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Apoptame™ F
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0.1 ml
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2070240
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Apoptame™ Q
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0.5 ml
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2070275
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Apoptame™ Q
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0.1 ml
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Apoptame™ 使用程序：
·驗證是否提高凍存細胞復蘇率的建議程序：
（1）至少聚集1x107 個細胞-足夠配制10管1 mL凍存液（106 cells/管）；
（2）用凍存培養基重懸細胞使其終濃度約為100,000個細胞/ml;
（3）對照： 1µL DMSO/ml體積的對照組細胞；（建議多做幾個平行）
（4）測試組：1µL Apoptame™/ml體積的待測組細胞，此時Apoptame™的濃度為20 µM；
（5）根據標準步驟凍存細胞（直接加入液氮或冷凍程序）；
（6）48h后取出幾管對照組和測試組細胞凍存液。
（7）在合適的三角瓶或培養皿內孵化控制組和待測組細胞，根據實驗需要在解凍后的不同時期記錄復蘇率、細胞活性及生長率。
·驗證是否提高細胞活性的建議程序：
對照組：1µL DMSO/ml體積的對照組細胞；（建議多做幾個平行）
測試組：1µL Apoptame™/ 2 ml體積的待測組細胞，此時Apoptame™的濃度為10mM；（也可以稀釋Apoptame™以 1µL加入4mL培養液，濃度為5µM）。在合適的三角瓶或培養皿內孵化控制組和待測組細胞，根據實驗需要不同時期記錄細胞活性及生長率。
注意事項：
若Apoptame™以凍干粉形式供應，必須將其懸浮在100%的DMSO溶液中。加入1mg的該產品至100µL DMSO中，配成20mM的母液。可以配制更高的濃度。我們曾成功配制Apoptame™ Q母液其濃度高至400mM或者1mg/5µL，但是濃度太高較難處理。
廠家說明：
MP Biomedicals生物醫學公司是位于美國加利福尼亞州的知名生命科學和生物技術廠商。2004年底成功收購Qbiogene、ICN，現在全球有5個大型倉庫，能夠及時供應各行業需求，亞洲倉庫位于新加坡。它致力于生命科學領域的基礎研究和探索。目前它提供55000多種產品，是世界上能全面提供生命科學產品和臨床診斷產品的幾家廠商之一。前塵生物為MPbio公司正規代理，提供MP bio公司所有產品的售后服務。
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